普遍性转导
普遍性转导是以温和噬菌体为载体,将供体菌的一段DNA转移到受体菌内,使受体菌获得新的性状,如转移的DNA是供体菌染色体上的任何部分,则称为普遍性转导.
在普遍性转导中,噬菌体可以转导给体染色体的任何部分到受体细胞中
(generalized transduction)
一、发现
1951年,Joshua Lederberg和Norton Zinder为了证实大肠杆菌以外的其它菌种是否也存在接合作用,用二株具不同的多重营养缺陷型的鼠伤寒沙门氏菌进行类似的实验,他们发现二株营养缺陷型混合培养后确实产生了约10-5的重组子,又一次成功地证实了该菌中存在的重组现象。但当他们沿着发现接合作用的思路继续用“U”型管进行同样的实验时,惊奇地发现:在给体和受体细胞不接触的情况下,同样出现原养型细菌。幸运的是他们的混合实验中,所用的沙门氏菌LT22A是携带P22噬菌体的溶源性细菌,另一株是非溶源性细菌,因此结果的解释必然集中到可透过“U”型管滤板的P22噬菌体,推测是它们进行着基因的传递。 经过后来进一步的对可过滤因子的研究和比较获得证实,从而发现了这一重要的基因转移途径。这是一个表面看起来的常规研究却导致一个惊奇和十分重要发现的重要例证之一。
二、转导模型
图8-19显示P22介导的的基本过程。从图中可以看到,由给体细胞可产生二种类型的子代病毒,其中一种(右边,约10-6-10-8)病毒颗粒内包含的不是病毒DNA而是给体细胞的染色体DNA,这种病毒称转导颗粒或转导噬菌体,由它们感染受体细胞后,将给体的DNA导入受体细胞,通过同源重组形成转导子。那么转导噬菌体为什么“错”将 宿主的DNA包裹进去了呢?研究表明,这与噬菌体的包装机制有关,图8-20表示P22噬菌体DNA的包装机制:进入细胞的P22DNA经环化(冗余末端之间重组)和滚环复制形成一个多联体(co ncatemer)分子。DNA的包装从基因组的一个特殊位点(pac,package)开始,用噬菌体编码的酶按顺序进行切割,并以“headful”的长度进行包装,如此同时,该酶也能识别染色体DNA上类似pac的位点并进行切割,以“headful”的包装机制包装进P22噬菌体外壳,形成只含宿主DNA的转导噬菌体颗粒。但这种“错装”机率很小(10-6-10-8),因为染色 体上的pac与P22 DNA的pac序列不*相同,利用效率较低。形成转导颗粒的噬菌体可以是温和的也可以是烈性的,主要的要求是具有能偶尔识别宿主DNA的包装机制并在宿主基因组*降解以前进行包装。
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