乳胶颗粒凝集试验（LPAT）检测与鉴定热不稳定肠毒素

由Finkelstein等建立，方法如下。

①乳胶敏化 取lOlL羊抗人源LT-I血清与19Oμl pH8、2*缓冲盐水混匀，再加等体积乳胶制剂，混匀，37℃水浴孵育2h，每15min振摇1次，然后加入用上述缓冲液稀释的O．1％牛血清白蛋白600uL，3Orain而后即可使用。

②待检菌液制备 从MacC或EMB或；HE等琼脂上挑取待检菌落，在装有3Ortl的20000U／ml多黏菌素B的Tris-NaCl缓冲液的指形管内制成菌悬液，37℃水浴温育5～3Omin（视菌液浓度而定），离心沉淀细胞，上清液待检。

③正式试验 在玻片上加10uL待检上清和5,aL致敏乳胶，混匀，轻轻摇动3min，在斜射光下观察结果，判定标准同一般凝集试验。如用抗LT全血清致敏乳胶，检测敏感性为印g／m1的LT；若以亲和层析纯LT抗体敏化乳胶，其灵敏度可达O．O32ug／m1的LT，且无假阳性结果。本法还能检测猪源LT-1。Scotland等用这类商品化试剂盒检测了1OO株大肠杆菌，其结果与Y1细胞法*吻合。

Honda等已报道用LT抗体致敏的葡萄球菌凝集试验宋检测LT，其原理与上法相似。