抗丝集蛋白（角蛋白）抗体自身抗原

1．定义 由于角蛋白（或细胞角蛋白）是角质层的主要蛋白成分，所以RA患者血清中与大鼠食管反应的特异性抗体被称之为“抗角蛋白抗体”。尽管对其特异性缺乏免疫化学的证实，至少有四个特点表明人上皮细胞的角蛋白不是AKA的靶抗原：①用兔抗人上皮细胞角蛋白抗体与RA血清预反应后再作用于大鼠食管的冷冻组织切片，不能消除或降低RA血清与角质层的反应；②用人表皮细胞角蛋白预吸收处理RA血清，不能缓解RA血清随后与大鼠食管角质层的反应；③采用ELISA测定抗人表皮细胞角蛋白天然IgG型抗体的滴度与RA血清中AKA的滴度*不一致，如果以大鼠食管上皮提取的细胞角蛋白为抗原检测则不是这种情况；④RA血清与取自于大鼠食管上皮细胞或角质层的角蛋白免疫印迹反应呈微弱或无的反应。
从AKA阴性及RA患者表皮中，通过免疫学方法提取出一种40kD的蛋白，通过肽谱分析，确认为是碱性丝集蛋白的一种中性／酸性同分异构体：①特异性的抗丝集蛋白的单克隆抗体能与40kD蛋白质反应；②以40kD蛋白质作为抗原，从RA血清中通过亲和层析纯化出的自身抗体与纯化的丝集蛋白发生免疫反应；③用纯化的丝集蛋白免疫吸附RA血清后，RA血清就不再与40kD蛋白质反应；④40kD蛋白质和丝集蛋白有相似的氨基酸组成；⑤从免疫吸附试验看出，AKA和抗40kD蛋白质抗体在很大程度上是相同的。
表皮丝集蛋白是一种分子量为37 000的带正电荷的蛋白质。在上皮的颗粒层被合成其前体—前丝集蛋白，并储存在角质层的小颗粒中．它是一种高度磷酸化的多聚蛋白，由肽段接头连接由前后排列的重复丝集蛋白单位组成。在后来的分化阶段，前丝集蛋白去磷酸化并水解成为功能性碱性丝集蛋白分子。丝集蛋白和前丝集蛋白都富含碱性氨基酸和*，不含蛋氨酸和含硫氨基酸。因含有11％一12％的*，而曾被称为“富*蛋白”。在完成了在细胞角蛋白线状物聚集的功能之后，丝集蛋白的*残基被肽精氨脱氨酶作用修饰为中等酸性残基从而降低了对细胞角蛋白的亲和力。
表皮丝集蛋白具有两种功能：一是在底层角化细胞中，碱性丝集蛋白相互作用并将细胞角蛋白线性物装配成巨纤丝。二是促成细胞角蛋白间二硫键的形成。这些密集包裹的线性物和丝集蛋白形成角化细胞的细胞基质。除在上层的角化细胞中，在线性物间作为聚集蛋白之结构外，丝集蛋白*被蛋白水解成游离氨基酸及其衍生物如尿酸和吡咯烷羧酸。这些角化层表层的高浓度成分在保持高渗透压和吸收紫外光方面起关键作用。zui后，丝集蛋白的第三种功能即它是角化屏障的前体。
2．来源 目前，丝集蛋白和其中性／酸性同分异构体及其前丝集蛋白尚无商业化产品。
和前丝集蛋白相关的大鼠食管上皮分子不同，用不同的一维二维电泳技术分离的大鼠食管上皮的各种提取物的蛋白质与RA血清的免疫印迹反应显示，有三种低盐溶性抗原是AKA的靶抗原，这些抗原易被蛋白酶K破坏，因而具有蛋白质性质。两种蛋白质
分子量为210kD和120—90kD。它们的等电点均在5．8—8．5变化。第三种蛋白的等电点在4．5一7．2的范围内，其分子量在130～60kD之间。用取自大鼠食管角化层的细胞角蛋白免疫吸附处理RA血清标本后，不影响它们与上述三种抗原蛋白免疫反应。应用去糖基化和去磷酸化的方法不能改变这些蛋白质的电泳迁徙或它们与RA血清标本的免疫反应。这些蛋白质不同于大鼠表皮（前）丝集蛋白，而与这些分子的组织特异性变化有关。这些蛋白质的细胞功能还不明了，可能与（前）丝集蛋白相似。
3．序列特征 对前丝集蛋白cDNAs和前丝集蛋白基因的分离及分析提示一个多聚蛋白前体是由大量的前后排列的丝集蛋白单位组成的，具324个氨基酸（972bp）。前丝集蛋白mRNA为13kb。在颗粒层由三个外显子转录而成，*个外显子不被翻译。前丝集蛋白基因位于染色体lq21段具有高度多态性，在人类包含10、11或12重复序列。相邻的重复序列显示，氨基序列有20％的差异，因而产生丝集蛋白等电点的多样性（7．2—9．4）。氨基末端肽与具有EF臂结构的钙结合蛋白序列类似，如钙调蛋白。事实上，前丝集蛋白是一种功能性钙结合蛋白。这种基因的5’段含有许多调节序列，如维甲酸应答片段。